以核酸或蛋白质等为研究对象的学科称为分子生物学。随着DNA双螺旋结构模型的提出,分子生物学技术也为大众所认知,且受到广泛关注,不仅推动了遗传研究学进步,为生命遗传信息提供了多样化可能,也为其他相关学科的快速发展奠定了良好基础,如细胞学、血液学、生物化学以及微生物学等。分子生物学技术也被用于现代医学,本文重点谈谈在医学检验工作中,分子生物学技术的具体应用。
分子生物学技术以核酸生化为前提为临床主治医师提供新型检验措施,使得临床病情分析、诊断工作效率与工作质量得到大幅度提升。
(一)聚合酶链式反应
聚合酶链式反应(PCR)也被称为无细胞克隆技术或者多聚酶链反应。应用PCR技术能获得丰富、全新的样品靶DNA序列缺陷,改变了传统检验诊断以及科学研究。在临床分子生物学中,PCR技术现阶段广泛应用于食品检测、出入境检验检、寄生虫学、免疫学以及基因治疗等工作中。在微生物学、肿瘤学以及免疫学等工作中,PCR技术也得到了非常广泛的应用。等位基因特异性PCR技术、PCR-限制性片段长度多态性分析法等技术是PCR技术的发展延伸,前者能准确鉴定基因型,后者则能检测与特定酶切位点有关的突变手段。此外,还包括实时荧光定量PCR、定量聚合酶链反应,该技术能对定量检测目的DNA,而且检测更加便捷,准确度也更高;而PCT-单链构象多态性技术则能检测产物的序列内多态性。
(二)生物芯片技术
生物芯片技术能一次性检测大量生物分子,也被称为高通量密集型技术,不仅包括组织芯片、蛋白质芯片,还包括基因芯片。生物芯片技术不仅可用于流行病学筛查以及疾病诊断,还可用于科学研究。
(三)分子生物传感器
分子生物传感器的识别元件为固定化生物分子,其完整的分析系统组成包括信号放大器装置、处理换能器装置。在分体体液的一些小分子有机物、生物大分子等多种物质的检验检测中均可使用分子生物传感器。上述检验项目都可以为诊疗病情、环境监测提供依据。
(四)DNA测序技术
在对疾病进行分子诊断时,DNA测序技术能获得精确的数据,第一代测序技术的费用较为昂贵,而且检测效率较低,主要是采用双脱氧末端终止法。不断改良后的第二代测序技术,通量高、规模大、成本低,技术平台包括焦磷酸测序、合成测序和芯片测序。第三代测序的检测效率更加高效,特点主要是单分子实时测序。
(五)联合技术
联合技术包括了色谱技术、抗体工程、蛋白质工程等,在蛋白组学中应用联合技术能获得精准、详细的基因序列编码框架,能为早期诊断和检测提供生物学标志,有助于医生充分、全面地了解疾病进程,加快研究人员药物研究的速度。
在医学检验中,分子生物学技术是现阶段非常重要的诊疗手段之一,但是部分因素会限制此类技术的临床推广,如反应试剂盒以及药品试剂盒的价格贵、检验技术比较繁杂、对检验仪器具有较高要求等。具体表现主要为:①检验项目的选择不合理。雖然分子生物学技术的检验特异度和灵敏度较高,但是在实际的临床检验工作中,并没有结合具体情况选择合理、科学、经济的检验项目。②在诊断疾病时过于依赖检验结果。在诊断疾病时,医生应综合分析患者的各项临床资料,不能过于依赖分子生物学技术的检验结果,避免漏诊或者误诊,让患者错失最佳治疗时机。
在今后的临床研究工作中,研究者应针对上述不足不断简化并完善操作流程,控制实验投入,实现实验过程全自动化,避免人为因素影响检验结果,不断完善分子生物学技术,大幅提高检验特异度与敏感度,为临床疾病治疗提供可靠的参考依据。
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