第1篇：以叶酸为靶向的高分子药物研究进展

近年来，癌症已经成为威胁人类健康的头号杀手。癌症治疗主要通过手术切除、放射治疗、化学疗法3种手段。手术切除和放射治疗主要适用于良性的非转移性肿瘤，治愈率高，几乎无复发的可能。化学疗法主要用于治疗晚期的恶性肿瘤，其疗效处于较低的水平，这是因为抗肿瘤药物本身并不具备识别细胞的功能，在杀死癌细胞的同时也会对人体内的正常细胞造成一定的伤害，并会产生严重的毒副反应，如肾毒性、神经毒性、骨髓抑制等，常常导致治疗的失败。为了使抗肿瘤药物能够更有效地针对肿瘤细胞进行诱导凋亡，近年来，科学家们提出了一个新的观念——靶向给药系统。这个系统是通过具有肿瘤细胞靶向性的载体，经血液循环来将抗肿瘤药物运输到靶器官，从而能够使抗肿瘤药物更充分地发挥治疗作用。目前，国内外对靶向给药的研究已进行得如火如荼，而如何能够提高药物的靶向性，更是医药学领域研究工作的重点。[1]（P152-155）

靶向治疗能够使抗肿瘤药物在患处保持较高的药物浓度，并且延长了药物作用在病变部位的时间，提高了药效，降低了药物对人体正常细胞的毒副作用，从而减轻了患者的痛苦。其中叶酸受体介导的靶向药物输送是目前最引人注目的靶向癌症治疗研究技术之一。[2]（P1127-1141）[3]（P2135-2146）

叶酸是一组化学结构相似、生化特征相近的化合物的统称，由蝶啶、对氨基苯甲酸和一个或多个谷氨酸结合而成的[4]（P177-179）。它是一种人体内所必需的维生素，也是DNA和所需酶系统中的重要辅酶，所以，叶酸对维持体内正常细胞和增殖细胞的生长发育具有重要的作用。[5]（P676-680）研究表明，叶酸受体在大部分肿瘤细胞表面均有过度表达。[6]（P3396-3401）[7]（P2432-2443）但叶酸受体的表达水平也与肿瘤的不同阶段有关，早期肿瘤的叶酸受体表达较低，高度恶化或者晚期的肿瘤受体表达会有所增强，在此之外，部分转移瘤的表达水平显着高于原发瘤。所以，叶酸受体是一种良好的肿瘤标记物，目前已被用作临床诊断。[8]（P5329-5338）

以叶酸为靶向的技术可以将各种抗肿瘤药物如高分子药物胶束、基因药物、蛋白毒素、小分子化疗药物、放疗药物以及中子捕获剂等选择性地运送到各个病变组织。[9]（P44-51）[10]（P131-150）本文主要综述了以叶酸为靶向的高分子药物的研究进展。

由于多数叶酸偶联物的体积较大，对其来说想要到达肿瘤细胞并被肿瘤细胞所摄取都不是件容易的事，所以，纳米级的叶酸偶联物备受研究者的关注。又因为两亲性嵌段共聚物的可生物降解性，使其成为了目前高分子聚合物药物载体研究的一大热门。这种两亲性的嵌段共聚物由亲水段与疏水段两部分构成，在水溶液中能够形成对药物包裹良好的纳米胶束，是抗肿瘤药物“坚硬”的外壳。[11]（P293-243）而在抗肿瘤药物外壳的亲水端表面连接叶酸分子，能够显着地增强与高表达叶酸受体的肿瘤细胞之间的亲和力和选择性，同时也显着增强对肿瘤细胞的细胞毒性，并降低了对正常人体细胞的毒副作用。[12]（P158-168）[13]（P273-283）

Park等人[14]（P1053-1061）将一种具有疏水的内核和亲水的外壳结构，由MPEG和ε-聚己内酰酮组成的两性纳米粒子与叶酸相连，作为高分子药物紫杉醇的载体。由于有抗肿瘤作用的紫杉醇被包裹在粒子的核心内，减少了紫杉醇与细胞的直接作用，从而大大降低了抗肿瘤药物对正常人体细胞的毒副作用。

Lee等人[15]（P1-2）将PLLA-PEG共聚体和聚组氨酸-PEG混合，得到对PH敏感的聚合物胶束。这种胶束连接上叶酸，也能够提高药物胶束的靶向性，同时降低对正常细胞的毒副作用。

Yoo等人[16]（P273-283）制成了一种可以生物降解的含阿霉素的叶酸靶向的聚合胶束。他们将PLGA与PEG相连，然后将阿霉素连至PLGA的一个末端，得到药物胶束DOX-PLGA-PEG。再在PEG的末端连接作为靶向的叶酸。最后将FA-PEG-PLGA与DOX-PLGA-PEG这两种共聚物在水溶液中与游离阿霉素进行物理混合，得到亲水层向外、疏水层在内的叶酸靶向的高分子药物胶束。叶酸暴露在胶束的表面，DOX被物理和化学双重性质的包埋在胶束的核心。由于胶束外表面为亲水性的表面（通常<100nm），聚合胶束能在体内保持较长的循环时间。其所连结的叶酸则提高了胶束的肿瘤靶向性和药物在细胞内的释放速率。

张琳华[17]（P1742-1748）等人以两亲性三嵌段共聚物聚己内酯-b-聚乙二醇-b-聚己内酯、甲氧基聚乙二醇二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、偶联叶酸的磷脂为载体材料，制备出新型叶酸靶向的载紫杉醇聚合物纳米囊泡。首先以辛酸亚锡作为催化剂，用PEG8000引发ε-己内酯开环聚合，合成了PCL-b-PEG-b-PCL两亲性三嵌段共聚物。再用薄膜-超声分散法制备出叶酸靶向的紫杉醇聚合物纳米囊泡。又通过对BALB/c小鼠的荷EMT-6乳腺癌的抑瘤作用实验得知叶酸靶向载紫杉醇聚合物纳米囊泡具有与紫杉醇/聚氧乙烯蓖麻油注射剂类似的抑制作用。而与mPEG-DSPE修饰的载紫杉醇纳米囊泡相比，叶酸靶向的载紫杉醇纳米囊泡对细胞的毒性更强、对荷EMT-6乳腺癌BALB/c小鼠肿瘤抑制作用更强，表明运用肿瘤细胞表面有大量叶酸受体这一特性，通过叶酸靶向作用将纳米囊泡导入肿瘤细胞内能有效提高抑制肿瘤的能力。

张严[18]（P58-59）等以聚乙二醇与聚（乳酸-碳酸酯）MPEG-b-P（LA-co-MCC）键合紫杉醇（PTX），制备成紫杉醇（PTX）纳米胶束M（PTX），又分别用两亲性聚合物载体MPEG-b-P（LA-co-MCC）和MPEG-b-P（LA-co-DHP）来共轭键合叶酸基元与紫杉醇，根据特定的比例来混合这两种胶束，通过共价结合，构成了载着靶向基元与抗肿瘤药物的混合胶束FA-M（PTX）。胶束合成完毕后，进而又进行了体外细胞实验与体内活性实验。通过实验得出结论，应用不同药物PTX，M（PTX）和FA-M（PTX）分别经过12h、24h和48h后，H22细胞存活率与紫杉醇当量的浓度梯度相关。而在作用了24h和72h后，给药组的凋亡率就显着地增加了，作用24h后H22细胞存活率PTX综上所述，叶酸-高分子药物胶束对药物的靶向输送因其对肿瘤组织的高选择性、对正常细胞的低毒副作用、对药物的缓释而日益受到科学家的重视，但是在这一方面的研究，在总体来说还是处于初级的起步阶段，大部分还是以体外细胞实验以及动物实验为主。而许多叶酸靶向的载药系统虽然活性高，对正常人体细胞的毒副作用小，但是要作为抗肿瘤药物应用于临床之前，还是需要再进行更多的动物模型以及人体实验。

靶向治疗已经成为了当前肿瘤治疗的主要方向和潮流。而如何更好地完成靶向治疗，并与其他治疗手段相结合，提高治疗效果和改善生存质量，这将在对肿瘤进行综合治疗中发挥重要的作用。

作者；马妍春，朱志新，高莹，闫行，马玉芹

第2篇：高分子药物的发展展望

对大部分病人来说，每隔几小时或一天要服用一次药物，药物在体内就会出现浓度的“峰谷”现象。刚服完药时药物浓度最高，处于峰值期，可能会产生毒性和副作用。随着时间延长，药物浓度逐渐降低，最后浓度达到最低，此时药物达不到治疗效果。为了使药物在体内保持恒定浓度、达到最佳治疗效果，需要控制药物释放速度。通常采用的手段有：将药片压实、添加降低药物溶解性的物质、用缓慢溶解的胶囊包复药物、敏感载体包裹药物。

随着高分子聚合物科学和现代医药学的相互渗透，高分子聚合物作为药物控制释放载体已成为最热门的研究方向之一。高分子聚合物作为药物载体的优点有[1]：1）聚合物分子质量大，作为载体可以让药物在病灶部位停留较长时间；2）药物在聚合物粒子内能通过扩散或自降解达到缓释或可控释放的目的；3）可以把具有靶向作用或控制药物释放的功能性组分通过化学键合的方式接枝到纳米粒子表面；4）选用可生物降解聚合物，能避免药物释放后载体聚合物留在人体器官组织内积聚，产生毒副作用。本文综述了可控释放高聚物的种类和影响其载药性能的因素，并对其未来发展做了展望。

1可控药物释放高分子聚合物分类

1.1按降解方式在化学控制药物释放体系中，聚合物基体可在释放环境中降解。当药物释放完毕后，聚合物基材可以完全降解以至消失，在医学上这种体系不需要手术将基材从体内取出，给病人带来很大的方便。所谓降解是指大分子主链断裂并导致聚合度降低的过程。按降解方式高分子聚合物可分为生物降解型和外界触发型[2]。

生物降解型可生物降解聚合物可用作一些半衰期短、稳定性差、易降解及毒副作用大的药物的控释制剂基材，可有效地拓宽给药途径、减少给药次数和给药量、提高药物的生物利用度、最大程度减少药物对全身特别是肝、肾的毒副作用。可生物降解聚合物作为抗原贮存场所，可增加抗原在体内吸收、运输过程中的稳定性，通过扩散或聚合物降解抗原能在较长时间内缓慢或脉冲释放，单剂接种即能产生与常规多剂免疫相同的效果[3]。

壳聚糖具有良好的生物相容性、生物降解性和药物的吸收性能，是性能优良的高分子材料。Liu等[4]通过自由基聚合的方法用壳聚糖（CS）、单体丙烯酸（AA）、甲基丙烯酸甲酯（MMA）和N-异丙基丙烯酰胺（NIPAM）等单体合成了纳米水凝胶共聚物。通过粒度分析、Zeta电位、红外光谱和扫描电镜对此纳米凝胶进行表征。结果表明，纳米水凝胶大小为140～190nm，均匀的球形且带明显的正电荷。在更广泛的pH值范围它们表现出良好的溶解行为以及在37℃具有很好的温敏性。

外界触发型随着现代医学及材料科学的快速发展，对生物医学用途的聚合物水凝胶的性能要求也越来越高。理想的生物医用聚合物水凝胶不但要具备良好的生物相容性和生物降解性，而且还应具有降解时间（速率）可调控、降解产物无毒或低毒性、不会引起炎症和致畸反应等特点。常规的生物降解，如酯键的水解和酰胺键的酶解等，一般需要很长的时间才能使整块凝胶降解，且其降解速率往往是不可控的。而向水凝胶中引入可以刺激响应断裂的基团（如可以酸解、光断裂的基团），通过人体外界（或内部）环境变化作为触发开关，引起水凝胶网络发生断链，从而导致降解发生。该智能降解特性通过改变聚合物凝胶自身的物理化学性能（如传质与渗透特性）来达到实际应用目的。作为药物载体，该刺激降解行为能够实现对药物分子可控、靶向释放[5]。

合成了一种基于PEG和O-NB基团的光降解型水凝胶。当光照强度为10mW/cm2时，该凝胶在10min内能够完全降解，且随着光照强度以及波长的增加，降解速率分别呈现出加快、减慢的趋势，随着光照的停止，凝胶降解也停止。人体叶干细胞（humanmesenchymalstemcells，hMSCs）能够很好地包载进紧密的凝胶网络中，且光照条件下该细胞又能因凝胶网络降解而扩散且保持其活性不变。因此该凝胶可作为药物控释和组织修复材料应用。

1.2按响应形式单一响应型与正常组织相比，肿瘤细胞在无氧状态下糖降解速率很高，产生的大量乳酸堆积在肿瘤部位，使得细胞周围处于弱酸环境（pH值=6.0～7.0），同时肿瘤组织淋巴回流系统缺失，纳米颗粒和大分子表现出滞留现象，无法及时疏散细胞产生的热量，温度也比正常组织偏高。根据肿瘤组织这些特异性，研究了模拟肿瘤组织微环境敏感的高分子聚合物。按照微环境的的不同，可为pH敏感、温度敏感、还原敏感、光敏感、磁敏感、酶敏感、离子敏感等，以及对多种微环境敏感的多重敏感高分子聚合物。

1）pH敏感型一般来说，具有pH响应型的聚合物大分子网络通常是通过交联而形成的，网络中一般含有酸性或碱性基团，随着介质pH值、离子强度的改变，这些基团发生电离，导致网络内分子链间氢键解离，引起体积不连续的溶胀变化。韩等[7]采用可逆加成-断裂链（RAFT）聚合法，以丙烯酸异丁酯（IBA）、丙烯酸（AA）无规共聚物与聚丙烯酸-2-羟丙酯（PHPA）反应，制备了具有pH敏感性的两亲性嵌段共聚物[P（IBA-co-AA）-b-PHPA]。实验结果表明，P（IBA-co-AA）-b-PHPA是一种新型纳米材料，可以包载紫杉醇，载药胶束的体外释放呈明显pH依赖性，并且体外抗肿瘤活性也较好，有望成为理想的抗肿瘤药物载体。

2）热敏感型随着温度的变化温敏性高分子聚合物能发生体积的溶胀或收缩，从而控制药物的释放。水凝胶的温敏性主要来源于结构中含有对温度敏感的非共价键作用，如氢键、疏水作用、主客体识别作用等。Ha等[8]设计、制备了疏水药物喜树碱（CPT）修饰的低分子质量聚乙二醇单甲醚（mPEG2000）两亲性聚合物（CPT-PEG2000）。该两亲性聚合物在水溶液中由于疏水药物分子的疏水聚合而形成胶束结构。之后处于外壳的亲水性mPEG2000链与α-CD通过主客体识别作用形成PPR，利用PPR之间的氢键作用和疏水药物的疏水聚合成功制备了含有疏水药物分子的超分子水凝胶。该水凝胶的相转变温度为37℃。在37℃下，凝胶发生凝胶—溶胶的转变，加速了药物的释放。因此温度可以作为刺激信号来触发此类水凝胶中药物的释放。

3）还原敏感型还原响应高分子聚合物逐渐成为药物载体领域研究的热点之一。Yin等[9]将紫杉醇（PTX）与透明质酸（HA）用共价键连接起来合成了一种新型的偶联物HA-ss-PTX。该偶联物具有主动靶向性和选择性细胞内药物释放的协同双重特性。氧化还原反应的二硫键被引入到共轭物中来阻止药物在血液循环中的泄漏，在还原剂如谷胱甘肽反应肿瘤部位达到快速释药。这项研究被认为为未来进一步探索临床应用的智能给药系统提供了可能性。

4）酶敏感型酶敏感型聚合物是一种新型的智能药物载体材料，它的原理主要是在具有一定选择性催化酶存在的条件下，利用生物酶独特的水解蛋白质分子酰胺键的这个特性，从载体材料中释放出药物。通常情况下，如果没有蛋白酶的存在，蛋白质的水解速率相当缓慢。然而，肿瘤细胞与正常细胞相比，因为控制酶活性的机制出现问题，酶的表达是无法控制的，这就导致肿瘤细胞和正常细胞在很多酶的表达上有显着差异[10]。Aimetti等[11]报道了使用肽交联剂端巯基硫醇烯聚合所形成的一种可降解的四臂聚乙二醇冰片烯水凝胶。形成的水凝胶能够封装在光聚合之前加入的罗丹明标记的牛血清白蛋白，在用人中性粒细胞弹性蛋白质酶的酶处理之后可释放蛋白质。

复合响应型单一响应型药物载体材料所能实现的功能也比较单一，仅可以实现基因的靶向传递或药物的靶向释放，已经远远不能满足药物载体的需求。而多重响应型载体在未来的实际应用中具有更加重要的意义，因为它可同时对多种刺激进行响应，更加有利于实现其功能即使是在复杂的生理环境下[12]。当高分子聚合物链由多功能嵌段组成时还可以对2种或者2种以上外界环境变化作出响应，就能形成多重响应高分子聚合物，如pH/温度、还原/温度、温度/pH/磁敏感、温度/还原/pH敏感等。

1）pH/温度敏感型近几年pH/温度敏感水凝胶的研究十分活跃，已经成为国内外众多研究者关注的热点。这些刺激敏感型水凝胶在生物材料培养、分离、蛋白酶的活性控制、药物控制释放等方面具有潜在的应用价值。苟等[13]用海藻酸钠和聚N-丙烯酰基甘氨酸酯为单体制备了一系列pH/温度双重敏感半互穿网络水凝胶小球型药物释放载体。以吲哚美辛作为药物模型，研究了不同pH、不同温度和不同的海藻酸钠/聚N-丙烯酰基甘氨酸酯比例的条件下小球的药物释放行为。实验结果表明其载药凝胶对药物的释放行为具有很好的智能响应性，载药小球基本上可以通过胃液，保证药物主要集中于小肠部位释放，显示出一定的应用前景。

2）还原/温度敏感型詹等[14]以丙烯酸（AA）和N-异丙基丙烯酰胺（NIPAM）为单体，N，N39;-双丙烯酰胱胺（BAC）为交联剂，采用自由基沉淀聚合方法制备了一系列还原和温度敏感聚N-异丙基丙烯酰胺-丙烯酸（PNA）纳米凝胶。利用红外光谱、紫外-可见光谱、拉曼光谱、扫描电子显微镜和动态光散射等方法表征了纳米凝胶的结构、粒径、形貌和Zeta电位等，研究了PNA纳米凝胶对阿霉素盐酸盐（DOX）的负载和释放行为。研究表明PNA纳米凝胶有一定的还原和温度敏感性，能够很好地控制药物释放，比较适合作为药物载体。

3）温度/pH/磁敏感温度/pH/磁敏感是指该高分子聚合物在具有温度敏感和pH敏感的同时还具有一定的磁敏感。磁性对于生命体的影响是很重要的。血液中的血红蛋白因为本身就含铁因而具有磁响应性。同时，无数证据表明在所有的生命体包括人与动物体内，存在着大量的磁性受体，这些磁性受体主要是一些磁性微粒。Yuan等[15]将药物通过腙键与Fe3O4连接，腙键在酸性条件下是可以发生断裂的，因此该体系就具备了pH响应性。在Fe3O4纳米微粒表面包覆一层具有温度响应性的聚合物-聚（N-异丙基丙烯酰胺-co-N，N-二甲基丙烯酰胺）接枝的壳聚糖分子，该分子的LCST为38℃。因而这个体系具备了磁场、温度和pH三重响应性。当pH<5.3时，同时温度达到较低温度（低于38℃），药物的释放效率可以达到最高。

4）温度/还原/pH敏感近年来，人们对温度/还原/pH敏感性聚合物纳米颗粒作为药物控释载体材料也产生了很大的兴趣。这些多重响应性纳米材料能够拓宽载体的刺激-响应范围，并提高载体的生物相容性、多功能性而进一步提高聚合物纳米在药物控释中应用的潜力。张等[16]用二甲氨基乙基甲基丙烯酸酯（DMAEMA）为单体，利用2-（2-甲氧基乙氧基）乙基甲基丙烯酸酯（MEO2MA）与含二硫键的自引发单体进行自缩合乙烯基共聚合得到的超支化PMEO2MA（H-PMEO2MA）为大分子引发剂，引发进行原子转移自由基聚合，合成了具有pH、氧化还原以及温度多重响应性的超支化星形聚合物H-PMEO2MA-star-PDMAEMA。证明了H-PMEO2MA有低临界溶液温度（LCST）。胶束形成过程中，用这种聚合物胶束中装载尼罗红，形成药物释放系统，实验结果表明，该载药体系具有pH、温度和氧化还原响应性释放的特性，在生物医药领域有着潜在的应用价值。2展望聚合物纳米粒子用作给药载体前景广阔。选用的聚合物材料要具有良好的生物相容性，特别是释放药物后能生物降解，排出人体内，而天然高分子材料具有明显的优势。聚合物纳米粒子的单分散性要好，设计合成结构规整的聚合物，再自组装形成纳米粒子，是一条有效途径，可采用核或壳交联的方法提高自组装纳米粒子的稳定性。延长聚合物纳米粒子在体内的循环时间也是一种很好的方法。今后医药发展的主要方向具有生物活性的大分子药物，但这类药物存在稳定性差、难以被人体吸收等问题，而聚合物载体给药是比较理想的解决方法。

作者：纪萍，詹园，苏铭吉，王治国，何培新